Contenido

• Mejor visualización
• Identificación y clasificación
• Detección de viabilidad
• Identificación de estructuras celulares

Los microbiólogos estudian las características de los microorganismos, como algas, bacterias, protozoos, hongos y virus, utilizando un microscopio. Aunque algunos organismos, como los protozoos y las células de levadura son fáciles de ver a través de portaobjetos, las células bacterianas requieren tinción. Los científicos han desarrollado varios métodos, como la técnica de tinción de Gram, tinción resistente al ácido y tinción fluorescente para mejorar la visualización de células bacterianas y estructuras celulares. Usando tales métodos de tinción, es posible identificar las características estructurales que ayudan a clasificar las bacterias.

Mejor visualización

Los organismos bacterianos son tan pequeños que la mayoría de ellos son visibles solo bajo el microscopio con un poder de aumento de 1000 veces. Sin embargo, el simple aumento de tamaño no proporciona un grado suficiente de claridad, por lo que las bacterias deben ser coloreadas antes de la observación para proporcionar la claridad necesaria para la visualización.

Identificación y clasificación

La tinción de bacterias para distinguir entre tipos de bacterias se conoce como tinción diferencial. La tinción de Gram es una tinción diferencial que distingue a las bacterias según el contenido de la pared celular. En este método, las células bacterianas reaccionan con un tinte cristal violeta para volverse violeta. Mediante la adición de un agente blanqueador, algunas células bacterianas pierden su color, mientras que otras no. Mediante la adición de colorante de safranina, las células decoloradas se vuelven rojas, mientras que las células bacterianas que no pierden el color permanecen violetas. Las células que se vuelven rojas se denominan organismos gramnegativos y las células que no se vuelven rojas se clasifican como organismos grampositivos. La técnica de tinción de Gram proporciona un método rápido para la identificación inicial de bacterias implicadas en infecciones. Asimismo, el proceso de tinción resistente al ácido ayuda a identificar específicamente los organismos que pertenecen a la clase de bacterias llamadas micobacterias, como Mycobacterium tuberculosis.

Detección de viabilidad

En muestras de cultivos bacterianos, a menudo es importante detectar la presencia de células bacterianas vivas. Los métodos como la tinción fluorescente ayudan a identificar si las células en cultivo son viables o no. Las bacterias vivas tienen la capacidad de convertir el cloruro de tetrazolio 5-ciano-2,3-ditolilo (CTC) en un tinte que muestra una fluorescencia roja. Por lo tanto, cuando los cultivos de color CTC emiten estas fluorescencias, indica la presencia de bacterias viables. El yoduro de propidio es una tinción que actúa solo en células muertas que tienen membranas dañadas y, por lo tanto, es útil para identificar células bacterianas muertas.

Identificación de estructuras celulares

La tinción proporciona un método de visualización clara de varias estructuras celulares. Por ejemplo, el método de tinción de Feulgen permite la identificación del núcleo dentro de las células bacterianas, mientras que la tinción de Albert es útil para visualizar los gránulos metacromáticos. Asimismo, la técnica de impregnación con plata permite la identificación de espiroquetas. Los flagelos son fáciles de observar cuando están coloreados con el color de Ryu. La tinción con verde malaquita ayuda a identificar las esporas bacterianas.